תוֹכֶן
- מיקרוסקופיה קלה וביולוגיה של התא
- עשרות נהלים ניסויים פותחו
- כתמים כימיים ומיקרוסקופיה קלה
- קלות התקרבות
- יתרונות של מיקרוסקופיה פלואורסצנטית
- החיסרון של מיקרוסקופים קלילים
המיקרוסקופ האור, או המורכב, הוא כלי שכל סטודנט לביולוגיה יתקל בו. הבנת היתרונות של מיקרוסקופ האור תתן תובנה לשלוט בתועלת שלו בכיתה או במרפאה. הטכניקות הניסיוניות הרבות שהושלמו לשימוש במיקרוסקופ קל, קלות השימוש בו ובמחיר סביר יחסית בהשוואה לסוגים אחרים של מיקרוסקופים הופכות אותו לבחירה המועדפת על יישומים רבים בתחום מדעי החיים.
מיקרוסקופיה קלה וביולוגיה של התא
מכיוון שלא ניתן לראות תאים בעין ללא עזרה, מיקרוסקופיה היא מרכיב מרכזי בחקר מבנה ותפקוד התא. מיקרוסקופ אור משתמש במקור אור כדי להאיר את הדגימה בשדה בהיר. הדגימה מוכתמת כדי ליצור מבנים שהם בדרך כלל שקופים או כמעט חסרי צבע כהים יותר מהרקע וקלים יותר לראייה. טכניקת מיקרוסקופיה נוספת היא מיקרוסקופיה ניאון. במקום להשתמש בכתם כהה על רקע בהיר, התאים מוכתמים בצבעי ניאון ונראים על רקע כהה.
עשרות נהלים ניסויים פותחו
לימוד רקמות במיקרוסקופיית אור נעשה כבר למעלה מ- 50 שנה. מיקרוסקופיית אור היא הצורה הנגישה ביותר של מיקרוסקופיה ברחבי העולם ועדיין היא אחד מכלי ההדרכה העיקריים לפתולוגים, או לרופאים המאבחנים מחלות על ידי בדיקת מבנה רקמות מיקרוסקופי. אלפי מעבדות ברחבי העולם שיכללו עשרות נהלים ניסויים, ורבות מהן זמינות בחופשיות. השילוב בין עלות נמוכה לכמות הגדולה של המידע הביולוגי שמיקרוסקופ אור מספק הופך אותו לכלי רב ערך למחקר ולרפואה.
כתמים כימיים ומיקרוסקופיה קלה
התבוננות בדגימה במיקרוסקופיית אור מחייבת עזרה של כתמים כימיים צבעוניים. כתמים כחולים, אדומים, ירוקים וחומים אלה מקובעים לרקמות עם חומר כימי ברור הנקרא permount, המתקשה כאשר הם נחשפים לאוויר. יחד עם זאת, כתמים כימיים אלה והרקמות נמשכים שנים רבות ללא דהייה, ומאפשרים למדענים לבדוק את אותו הדגימה במשך זמן רב ללא אובדן צבע. אובדן הראות הוא מגבלה במיקרוסקופיית הקרינה מכיוון שהצבעים הניאון דוהים עם הזמן.
קלות התקרבות
יכולתו של המיקרוסקופ המורכב להתקרב בקלות בין התבוננות בזנבו של דג קטן פי 50 מגודלו האמיתי ועד לראות את העורקים בזנבו פי 400 מהגודל האמיתי, אין תחרות על ידי סוגים אחרים של מיקרוסקופים. פתולוגים בוחנים ביופסיות, או חתיכות קטנות של רקמות שהוסרו באמצעות מחט, תחת מיקרוסקופ מורכב ולעתים קרובות מתקרבים והתרחקים כדי להעריך את מיטבם. מיקרוסקופ האור המורכב נותר האפשרות הטובה ביותר למחקר מסוג זה.
יתרונות של מיקרוסקופיה פלואורסצנטית
מיקרוסקופיה פלואורסצנטית מספקת פרטים חזותיים גדולים יותר לצופה מכיוון שצבעים פלורסנטיים יכולים למקד למבנים ספציפיים בתא. מולקולות פלואורסצנטיות במדגם התא הנקרא פלואורופורים סופגות אור באורך גל אחד ופולטות אור באורך גל שונה. ניתן להשתמש בצבעי פלואורסצנט עם חלבונים ונוגדנים ספציפיים כדי להבליט מבנים ואפילו מולקולות בודדות בתא. טכניקות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית מאפשרות להשתמש בצבעים מרובים במדגם.
החיסרון של מיקרוסקופים קלילים
טכנולוגיית המיקרוסקופ התפוצצה בעשורים האחרונים, כאשר חלק מהמיקרוסקופים המתקדמים יותר מספקים מידע מפורט יותר מהמיקרוסקופ המורכב (האור) הקלאסי. מיקרוסקופים פלואורסצנטיים מאפשרים למדענים לראות שני חלבונים שונים באותו מיקום בתא באמצעות סמנים אדומים וירוקים החופפים זה לזה ליצירת צבע צהוב. מיקרוסקופים אלקטרונים מראים את התכונות התלת ממדיות של משטח תאים. אם לציין חיסרון אחד במיקרוסקופ האור, אין לו חלק מהיכולות המתקדמות של מיקרוסקופית ניאון או אלקטרונים מכיוון שהוא משתמש רק באור לבן. עם זאת, מיקרוסקופים אלקטרוניים ומיקרוסקופים פלואורסצנטיים נעים במחיר של עשרות אלפים למאות אלפי דולרים, ואילו כרגע ניתן לרכוש מיקרוסקופ מורכב במחיר של עד 100 $.