תוֹכֶן
Escherichia coli, E. coli, הוא חיידק הגדל במעיים התחתונים של יונקים. חיידק זה התגלה לראשונה בשלהי 1800. מאז הייתה לו היסטוריה ארוכה של שימוש במחקר מדעי. זהו האורגניזם הנפוץ ביותר בגנטיקה מולקולרית. חלק מהסיבה שמשתמשים לעתים קרובות ב- E. coli במחקר מדעי היא שקל מאוד לגדל במעבדה. הגורמים המקלים על גידול E. coli הם צרכיו התזונתיים הפשוטים, קצב הגידול המהיר ודרישות התחזוקה המתונות שלו.
עקר את לולאת החיסון על ידי הנחתה בלהבה של צורב הבונסן. העבירו את המחצית התחתונה של הלולאה דרך הלהבה עד שהיא זוהרת באדום.
אפשר לולאה להתקרר. אתה יכול לגעת בו באגר הסטרילי שבצלחת כדי לוודא שהוא התקרר. אל תניח את הלולאה על השולחן או תן לו ליצור קשר עם שום דבר אחר מלבד אגר סטרילי או לתרבות הרצויה כעת לאחר שעברו עיקור.
טבלו את הלולאה בתרבות E. coli ואז הסירו אותה.
פתח את צלחת האגר והחליק בעדינות את הלולאה קדימה ואחורה על פני שטח של חלק אחד של האגר. הקפידו לא לגרד את האגר עם הלולאה. האגר מספק את החומרים התזונתיים להם זקוקים ה- E. coli.
הניח שוב את הלולאה בלהבת מבער בונסן כדי לעקר אותה. ברגע שמוט הלולאה מתקרר, געו בו בחלק סטרילי של הצלחת כדי לוודא שהוא קר, ואז החלקו את הלולאה דרך הפס הראשון שלכם כדי ליצור פס שני. הפס השני הוא גרסה מדוללת של הפס הראשון. חזור על תהליך העיקור וההחלקה עד שהחליקו על כמה קטעים של צלחת האגר. הסיבה שאתה עושה זאת היא כך שתוכל מאוחר יותר לבחור מתוך מושבות משבצות בודדות. זה יעזור לוודא שיש לך לפחות קטע אחד שיש בו מושבות בודדות - לא מרוכז מדי (שיהיה בו צמיחה רבה מדי ולא יאפשר לך לבחור ממושבה אחת) ולא לדלל מדי (מה שלא יעניק שום מושבות) .
יש לעקר את הלולאה בלהבה פעם אחרונה לפני שמניחים אותה בצד באזור העבודה.
החזר את החלק האחורי לצלחת האגר. סובבו את הפלטה והכניסו לחממה שנקבעה 37 מעלות צלזיוס (98.6 מעלות פרנהייט). טמפרטורת דגירה אידיאלית זו מדמה את הטמפרטורה של גוף האדם בו שוכן E. coli. בתוך 24 עד 48 שעות, מושבות גלויות של חיידקי E. coli יופיעו בצלחת האגר.